細胞培養(yǎng)步驟一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備:1) 準(zhǔn)備基礎(chǔ)培養(yǎng)基100%;北美胎牛血清5%,添加劑1%;雙抗1%。2) 培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37攝氏度,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。二. 細胞處理:1) 復(fù)蘇細胞:將含有1ml細胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍,加入4ml培養(yǎng)基混合均勻。在1000rpm條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加1-2ml培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜(或?qū)⒓毎麘乙杭尤?50px皿中,加入約8ml培養(yǎng)基,培養(yǎng)過夜)。第二天換液并檢查細胞密度。2) 細胞傳代:如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養(yǎng)。
更新時間:2025-12-18