細(xì)胞培養(yǎng)步驟一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備:1) 準(zhǔn)備基礎(chǔ)培養(yǎng)基100%;北美胎牛血清5%,添加劑1%;雙抗1%。2) 培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37攝氏度,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。二. 細(xì)胞處理:1) 復(fù)蘇細(xì)胞:將含有1ml細(xì)胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍,加入4ml培養(yǎng)基混合均勻。在1000rpm條件下離心4分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加1-2ml培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過(guò)夜(或?qū)⒓?xì)胞懸液加入250px皿中,加入約8ml培養(yǎng)基,培養(yǎng)過(guò)夜)。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。2) 細(xì)胞傳代:如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
更新時(shí)間:2025-12-18